معاون اتاق اصناف ایران گفت: جلوگیری از عرضه آجیل و خشکبار به صورت فله ای، عدم برگزاری مراسم در رستوران ها و سفره خانه ها و جلوگیری از هر گونه تجمع در واحدهای صنفی از جمله ممنوعیت های شب یلداست.

به گزارش پایگاه خبری صنعت غذا و کشاورزی، به نقل از مهر؛ بهنام نیک منش، در مورد نظارت بر اصناف در شب یلدا گفت: اگرچه توصیه کرده ایم مراسمی برای شب یلدا برگزار نشود و اصناف هم همچون سابق بازاری ندارند اما باز هم تیم‌های بازرسی و نظارت را در قالب طرح تشدید مأمور کرده ایم که به صورت جدی بر بازار نظارت داشته باشند.

معاون بازرسی و نظارت اتاق اصناف ایران افزود: در این خصوص به استان‌ها نامه زده و بازرسی ویژه از واحدهای صنفی را به سراسر کشور ابلاغ کرده ایم. اگر تخلفی صورت بگیرد چه در حوزه گرانفروشی و چه در خصوص عدم رعایت پروتکل‌های بهداشتی، برای متخلفان پرونده تشکیل و به تعزیرات حکومتی ارسال می‌شود و حتی پرونده پلمپ هم برای واحد صنفی تشکیل خواهد شد.

وی با بیان اینکه در دستورالعمل ابلاغی چند نکته را مورد تاکید قرار داده ایم، گفت: لزوم جلوگیری از هر گونه تجمع در واحدهای صنفی، تاکید بر رعایت پروتکل‌های بهداشتی، تاکید بر رعایت فاصله گذاری مناسب و لزوم استفاده از ماسک هم برای متصدیان واحدهای صنفی و هم مشتریان، تاکید بر عدم برگزاری مراسم در رستوران‌ها و سفره خانه‌ها و امثالهم، لزوم عرضه محصولات آجیل و خشکبار به صورت بسته بندی‌های آماده، جلوگیری از عرضه کالا به صورت فله‌ای، تاکید بر لزوم رعایت دستورالعمل‌های بهداشتی و استفاده از وسایل فردی در مراکز عرضه گوشت و مرغ و مراکز تهیه و عرضه مواد غذایی و پرنده و … از جمله تکالیف واحدهای صنفی است که باید رعایت کنند و همین موارد نیز از سوی بازرسان ما بررسی و صحت سنجی می‌شود.

نیک منش تاکید کرد: واحدهای صنفی از ساعت ۱۸ امروز باید تعطیل شوند و این موضوع در همه مناطق کشور صدق می‌کند و هیچ منطقه‌ای مستثنی نیست.

سرویس خبری: صنعت غذا

منبع: مهر

نوشته معاون اتاق اصناف ایران: نظارت ویژه بر واحدهای صنفی در شب یلدا اولین بار در پایگاه خبری صنعت غذا و کشاورزی – اگروفودنیوز پدیدار شد.

به گزارش پایگاه خبری صنعت غذا و کشاورزی، به نقل از باشگاه خبرنگاران جوان؛ علی حسینی عضو شورای ملی زعفران، با اشاره به اینکه برداشت زعفران به پایان رسیده است، اظهار کرد: وزارت جهاد کشاورزی به عنوان متولی تولید باید آمار دقیق و صحیح تولید را در اختیار تشکل‌ها قرار دهد تا آن‌ها بتوانند برنامه ریزی مدونی برای آینده داشته باشند.

او با انتقاد از تعلل گمرک در اعلام آمار صادرات افزود: با وجود آنکه گمرک آمار به روز را اعلام نمی‌کند، آمار دقیقی از میزان صادرات نداریم.

حداکثر قیمت هر کیلو طلای سرخ ۱۶ میلیون تومان است

حسینی از ثبات قیمت طلای سرخ طی ۲ ماه گذشته در بازار خبر داد و گفت: در حال حاضر حداقل قیمت هر کیلو زعفران ۸ میلیون تومان و حداکثر ۱۶ میلیون تومان است.

عضو شورای ملی زعفران آینده بازار را در گرو صادرات دانست و افزود: رونق بازار زعفران به صادرات بستگی دارد.

او با تاکید بر این مسئله که تعامل بخش دولتی و خصوصی، حفظ رونق صادرات را به‌همراه دارد، بیان کرد: ارائه آمار اشتباه، تولیدکننده و صادرکننده را گمراه می‌کند و بنابر اعتقاد بخش خصوصی، سازمان مربوط تنها باید آمار را اعلام کند.

این فعال بخش خصوصی کاهش تعرفه را عاملی برای رونق صادرات برشمرد و گفت: تعرفه صادرات زعفران به چین و هند به عنوان ۲ بازار هدف اصلی بالاست و سال‌هاست که بر کاهش تعرفه صادرات تاکید می‌کنیم، اما مسئولان به این موضوع بی توجه بوده‌اند.

حسینی در پایان تصریح کرد: تعرفه صادرات زعفران افغانستان به چین و هند بسیار پایین و در حد صفر است، اما برای ما بسیار بالاست و همواره وظیفه دولت و سیاست گذاران است که این معضل و چالش اقتصادی را رفع کنند.

سرویس خبری: صنعت غذا

منبع: باشگاه خبرنگاران جوان

‌به گزارش پایگاه خبری صنعت غذا و کشاورزی، به نقل از باشگاه خبرنگاران جوان؛ علی احسان ظفری مدیر عامل اتحادیه تعاونی‌های لبنی، درباره آخرین جزئیات توزیع شیر مدارس اظهار کرد: در سال گذشته قرار شد شیر مدرسه در ۸ استان کمتر برخوردار توزیع شود، به همین خاطر دولت باید منابعی را به این امر تخصیص می‌داد.

او افزود: در ابتدا قرار شد اتحادیه لبنی با کارخانه‌ها قراردادی منعقد کند تا شیر در ۸ استان کمتر برخوردار توزیع شود و کار به اجرا برسد که با واریز پول به آموزش و پرورش در جلسه اعلام کردند که مصوبات را قبول ندارند و خودشان اقدام به توزیع می‌کنند. بنابر آخرین آمار تنها در ۲ تا ۳ نوبت توزیع صورت گرفته است.

ظفری با بیان اینکه آموزش و پرورش مطالبات کارخانه‌ها را که مربوط به سال گذشته است، هنوز پرداخت نکرده است، گفت: چندین سال است که وزارت آموزش و پرورش بودجه توزیع شیر مدارس را می‌گیرد، اما گویا در بخش‌های دیگر تغذیه استفاده می‌کند.

حداکثر نرخ خرید هر کیلو شیر خام از دامدار ۵ هزار و ۱۰۰ تومان
این مقام مسئول قیمت کنونی خرید هر کیلو شیرخام را ۴ هزار و ۸۰۰ تا ۵ هزار و ۱۰۰ تومان اعلام کرد.

مدیر عامل اتحادیه تعاونی لبنی با اشاره به اینکه صنعت لبنیات تعریفی ندارد، بیان کرد: گرچه تولیدکنندگان در تلاش هستند که روی پای خود بایستند، اما دولتمردان نگاه چندانی به تولید ندارند.

ظفری در پایان درباره آخرین وضعیت صادرات محصولات لبنی تصریح کرد: علی رغم تمامی مشکلات سد راه تولید، ۶۰ تا ۷۰ درصد سال‌های قبل محصولات لبنی صادر شده است که با این وجود نمی‌توان گفت رشد صادرات داشته‌ایم، چرا که مقداری صادرات افت کرده است.

سرویس خبری: صنعت غذا

منبع: باشگاه خبرنگاران جوان

مرتضی سلطانی تعامل بین بانک مرکزی و وزارت صمت را باعث توسعه صادرات دانست.

به گزارش پایگاه خبری صنعت غذا و کشاورزی، مرتضی سلطانی رئیس هئیت مدیره گروه صنعتی و پژوهشی زر ماکارون در گفتگو با خبرنگار اتاق بازرگانی ایران گفت: طی ۸ ماه گذشته مشکل صادرات و برگشت ارز حاصل از صادرات داشتیم.

سلطانی افزود: صادرکننده برای تولید، توسعه تولید و صادرات به ماشین آلات و تجهیزات و مواد اولیه احتیاج دارد و چه بهتر که رفع این نیازها از محل صادرات خود باشد.

مرتضی سلطانی در ادامه در خصوص سیاست های بانک مرکزی گفت: بانک مرکزی باید همراه و حامی تولید، تولیدکننده و وزارت صمت باشد. این تعامل کمک بزرگی به تولیدکننده می کند و باعث توسعه صادرات به صورت جدی می شود ولی اگر بانک مرکزی فقط به منافع خود توجه کند همه زیان می کنند.

وی همچنین گفت: باید برای عبور از این بحران با هم هم فکری و تعامل داشته باشیم و از اخذ تصمیمیات جزیره ای دوری کنیم.

بنیان گذار گروه صنعتی زر ماکارون در پایان گفت: اگر تعامل بین بانک مرکزی وزارت صمت باشد چشم انداز ۶ ماهه حوزه تولید و صادرات به مراتب بهتر از گذشته خواهد بود.

مشاهده فیلم در ویدئوی زیر:

https://agrofoodnews.com/wp-content/uploads/2020/12/مرتضی-سلطانی.mp4

یک شرکت دانش بنیان در پارک فناوری پردیس خط تولید استارتر لبنی را راه اندازی کرد که امروز توسط معاون علمی رونمایی شد.

به گزارش پایگاه خبری صنعت غذا و کشاورزی، یک شرکت دانش بنیان مستقر در پارک فناوری پردیس، به عنوان اولین شرکت دانش بنیان در زمینه تولید محصولات دارویی و مکمل های پروبیوتیکها، موفق شد با استفاده از راهکارهای واحد تحقیقات و توسعه بیش از ۵۰ محصول دارویی و مکمل دانش بنیان را به تولید برساند.

سحر بهمنی مدیر عامل این شرکت دانش بنیان در مراسم راه اندازی خط تولید استارتر لبنی گفت: این شرکت با جمع آوری نمونه های باکتریایی از سراسر کشور، موفق به تهیه جامع ترین بانک میکروبی ارزشمند در ایران از انواع باکتری های پروبیوتیک شده و همواره تلاش در بومی سازی سویه های مورد استفاده در محصولات پروبیوتیک دارد.

وی با بیان اینکه استارتر کالچرهای ماست محصولی نوین از شرکت است که از بهترین و خالص ترین باکتری های تولید کننده اسید لاکتیک بومی در ایران تولید شده بیان کرد: این باکتری ها در صنایع لبنی برای تولید با کیفیت ترین انواع ماست و نوشیدنی های تخمیری مورد استفاده قرار می گیرد.

به گفته بهمنی، این فرآورده پس از طی دوره ۳ سال فعالیت متخصصین در بخش تحقیق و توسعه شرکت تولید و بومی سازی شده و به واسطه این تلاش ها هم اکنون پلتفرم تولید صنعتی دیگر استارترها نیز فراهم سازی شده است.

وی ادامه داد: استفاده از میکروارگانیسم های تخمیری جهت تهیه و تولید فرآورده های لبنی پیشینه ای تاریخی داشته است که با گذشت زمان و پیشرفت علم، امکان تهیه و تولید بهترین و مرغوب ترین محصولات لبنی را که می توانند بر سلامت مصرف کننده تاثیر مستقیمی داشته باشند میسر کرده است.

وی با تاکید بر اینکه با راه اندازی این خط تولید، صنایع لبنی کشور بی نیاز از واردات می شوند، گفت: استارتر ماست تولید شده در این شرکت که از باکتری های استرپتوکوکوس ترموفیلوس، لاکتوباسیلوس بولگاریوس و بیفیدوباکتریوم لاکتیس به دست آمده که از مرغوب ترین میکروارگانیسم های زنده و فعال مورد استفاده در صنعت لبنیات است. این باکتری ها مسبب تولید محصولاتی با عطر و قوام مطلوب و سازگار با ذائقه ایرانی می شود.

مدیر عامل شرکت دانش بنیان اضافه کرد:اکنون امکان تولید این استارتر در مقیاس بالا فراهم شده است. جدا سازی میکروارگانیسم های پایه تولید کننده ماست (لاکتوباسیلوس دلبروکی زیرگونه بولگاریکوس و استرپتوکوکوس ترموفیلوس) شامل ۱-کشت اولیه جداسازی کلونی، آزمون های مولکولی PCR و توالی یابی و بیوانفورماتی، آزمون های تاییدی و بیوشیمیایی طبق استاندارد ملی ایران از مرحله اول این فرایند است.

وی گفت: در مرحله دوم تست های غربال گری سویه برتر تولید کننده ماست و بررسی فاکتورهای درونی سویه ها شامل اندازه گیری میزان تولید اسید لاکتیک و اندازه گیری میزان تولید ترکیبات آروماتیک، اندازه گیری میزان تولید اگزوپلی ساکارید(EPS)، اندازه گیری میزان توانایی تخمیر قند لاکتوز و بررسی سویه های واجد پلاسمید حامل ژن سیترات پرمئاز، بررسی مقایسه آرایش ژنی سویه بررسی شده با نمونه شاهد به روش بیوانفورماتیک و طراحی منحنی های رشد اتفاق می افتاد. ۲-فاکتورهای بیرونی، انجام آزمون های تست لخته بررسی ویژگی های رئولوژیکی(گرانروی و سفتی) ویژگی های فیزیکی (آب اندازی-ارزیابی حسی هیدونیک ۵ طبقه ای-بافت طعم- رنگ- قاشق زنی) از دیگر مرحله فرایند خط تولید است.

بهمنی ادامه داد: در مرحله سوم بهینه سازی محیط کشت و در مرحله چهارم لیوفیلیزاسیون شامل «استفاده از لیوفیلیزاتور تحقیقاتی – تهیه لیوفیلیزاتور صنعتی تهیه لیوفیلیزاتور صنعتی انجام می شود. همچنین در مرحله پنجم فرمولاسیون شامل «بهینه سازی نسبت تلقیح- کانت نهایی- تولید صنعتی – لیوفیلیزاسیون -انجام می گیرد.

سرویس خبری: صنعت غذا

به گزارش پایگاه خبری صنعت غذا و کشاورزی، به نقل از باشگاه خبرنگاران جوان؛ جمیل علی زاده شایق دبیر انجمن برنج کشور، با اشاره به اینکه تولید برنج از لحاظ کمی و کیفی نسبت به مدت مشابه سال قبل رشد داشته است، اظهار کرد: گرچه برداشت برنج در برخی استان‌ها تمام نشده، اما حداقل تولید ۲ میلیون و ۴۰۰ هزار تن است.

او افزود: با توجه به شرایط مساعد اقلیمی، فراوانی آب و آفتاب مناسب در فصل تابستان، تولید از لحاظ کمی و کیفی نسبت به سال قبل بهتر است.

حداقل تولید برنج ۲ میلیون و ۴۰۰ هزارتن
علی زاده شایق ادامه داد: با وجود تولید ۲ میلیون و ۴۰۰ هزار تن برنج، حداکثر نیاز به واردات ۶۰۰ تا ۷۰۰ هزار تن است که متاسفانه به سبب نبود کنترل و نظارت، بی رویه برنج وارد می‌شود.

دبیر انجمن برنج کشور در واکنش به استراتژی جدید واردکنندگان برای واردات برنج گفت: واردکنندگان برنج برای آنکه امکان واردات برنج با قیمت مناسب از کشور‌ها را نداشتند، به دنبال راهی بودند تا بتوانند برنج ارزان قیمت خریداری کنند؛ بنابراین واردات برنج پرمحصول از هند و پاکستان را مطرح کردند، در حالی که کل تولید برنج این کشور‌ها به سبب جمعیت بالا پرمحصول است و همانند کشور ما برنج کیفی ندارند.

به گفته او، با وجود اظهارات واردکنندگان مبنی بر واردات برنج پرمحصول می‌توان گفت که چنین ادعایی تمسخرآمیز است و تنها پوششی برای ارزان خریدن است.

علی زاده شایق با انتقاد از اقدام اخیر سازمان ملی استاندارد بیان کرد: اخیرا سازمان ملی استاندارد دست به حرکت نامناسبی زده است چرا که در مقطعی برنج‌های وارداتی از استاندارد خاصی برخوردار بودند، اما در شرایط فعلی استاندارد برنج‌های وارداتی زیر استاندارد برنج تولید داخل است.

این مقام مسئول افزود: انجمن برنج در خصوص استاندارد پایین برنج‌های وارداتی با سازمان استاندارد چندبار در این خصوص مکاتبه کرد.

علی زاده شایق با بیان اینکه عدم رعایت استاندارد واردات برنج فاجعه است، گفت: معاونت بازرگانی دولتی به سازمان ملی استاندارد اعلام کرده که تا آذر ۱۴۰۰ رعایت استاندارد ضرورتی ندارد که این امر فاجعه‌ای بیش نیست چرا که امکان واردات هر گونه برنج وجود دارد.

دبیر انجمن برنج ادامه داد: معاونت بازرگانی دولتی به بهانه حمایت از مصرف کننده، رعایت استاندارد برنج‌های وارداتی تا سال آینده را حذف کرده است که این امر بیانگر حمایت از مصرف کننده نیست، بلکه عادت دادن خانوار‌ها به برنج‌های با کیفیت پایین است.

به گفته او، تمامی کشور‌ها برای واردات کالا حداقل استانداردی می‌گذارند، کما اینکه بار‌ها برخی کالا‌های ایرانی همچون هندوانه و گوجه فرنگی به علت استاندارد پایین به کشور عودت داده شده است، حال نمی‌دانیم بازرگانی دولتی چطور به خود اجازه می‌دهد که طی نامه‌ای به سازمان استاندارد خواستار عدم رعایت استاندارد تا آذر سال آینده شود.

این مقام مسئول در پایان تصریح کرد: انجمن برنج طی نامه‌ای به وزارت صمت، وزارت جهاد کشاورزی و سازمان استاندارد خواستار اجرای استاندارد برنج‌های وارداتی شده، اما به نظر می‌رسد سازمان استاندارد دلش نمی‌خواهد زیر بار این حرکت غیر قانونی رود.

سرویس خبری: صنعت غذا

منبع: باشگاه خبرنگاران جوان

تازه ترین گزارش از وضعیت موجودی کالای اساسی در گمرک و بنادر نشان از افزایش موجودی کالای اساسی به ۵.۷ میلیون تن دارد.

مهرداد جمال ارونقی ،معاون فنی گمرک ایران آخرین گزارش از وضعیت کالاهای موجود در گمرک و بنادر و همچنین جزئیات کالاهای اساسی را به ایسنا اعلام کرد.

تا تاریخ ۲۶ آذر امسال هفت میلیون و ۱۱۴ هزار تن کالای غیر کانتینری و همچنین ۹۲ هزار و ۸۲۱ (TEU) میزان موجودی کالاهای کانتینری است که ۹۰ درصد آن را کانتینرهای پر وارداتی تشکیل می‌دهد.

اما از مجموع بیش از ۷.۱ میلیون تن کالای غیر کانتینری موجود در گمرک و بنادر، بیش از ۳.۸ میلیون تن به کالاهای اساسی اختصاص دارد.

۴۲ شناور به بنادر رسید

البته باید به موجودی کالاهای اساسی، حجمی از کالاها که در شناورهای کنار اسکله یا شناورهای منتظر در لنگرگاه برای تخلیه کالا هستند را اضافه کرد که در این حالت مجموع موجودی کالاهای اساسی به بیش از ۵.۷ میلیون تن می رسد.

گزارش معاون فنی گمرک ایران نشان می دهد که تا ۲۶ آذر ماه، در مجموع ۴۲ شناور به بنادر رسیده که حاوی حدود دو میلیون تن کالای اساسی است. این در حالی است که ۲۱ شناور کنار اسکله با ۹۹۲.۵ هزار تن کالای اساسی قرار دارد شامل جو، ذرت، سویا، دانه های روغنی، گندم و کنجاله سویا می شود. همچنین ۲۱ شناور در لنگرگاه در انتظار تخلیه قرار هستند که موجودی کالاهای اساسی آن به بیش از یک میلیون تن شامل ذرت، جو، سویا و حبوبات می رسد.

در بنادر چقدر و چه کالایی وجود دارد؟

در رابطه با جزئیات موجودی ۳.۸ میلیون تنی کالاهای اساسی نیز در حال حاضر حدود ۱.۷ میلیون تن ذرت در گمرک و بنادر وجود دارد که بالاترین میزان بین کالاهای اساسی است. همچنین ۲۹۳.۲ هزار تن گندم، ۲۵۷.۹ هزار تن جو، ۴۴۴.۸ هزار تن سویا، ۱۰۶.۷ هزار تن برنج، ۱۸۳.۵ هزار تن شکر، ۴۵۲.۴ هزار تن روغن خام و ۳۸۳.۷ هزار تن دانه های روغنی در بنادر موجود است.

اما در بین بنادر، بیشترین موجودی کالا به بندر امام خمینی(ره) با بیش از ۲.۷ میلیون تن اختصاص دارد. بعد از آن بندر شهید رجایی بیش از ۴۴۸.۲ هزار تن، بندر امیرآباد ۲۸۷.۳ هزار تن، بندر نوشهر ۱۵۱.۱ هزار تن، بندر انزلی ۱۱۵.۶ هزار تن، بندر فریدون کنار ۲۵.۹ هزار تن، بندر چابهار ۲۰.۸ هزار تن، بندر لنگه ۱.۵ هزار تن، بندر شهید باهنر ۶۲۷ تن، بندر بوشهر ۱۳۸ تن و بندر آستارا ۱۲ هزار تن موجودی دارد.

با انباشت میلیون ها تن کالا در گمرک و بنادر که عمده آن را کالای اساسی و مواد اولیه تولید تشکیل می دهد و انتقاداتی که در رابطه با موانع پیش روی ترخیص این کالاها وجود داشت، در نهایت طی مذاکرات صورت گرفته در آبان امسال، مصوبه ای در راستای تسهیل ترخیص کالا با تاکید بر رفع موانع ارزی در ستاد هماهنگی اقتصادی دولت صادر شده که طی آن صاحبان کالای اساسی و مواد اولیه تولید طبق شرایط تعریف شده امکان اقدام برای ترخیص دارند.

آخرین گزارشی که مدتی پیش از سوی وزارت صمت و گمرک ایران منتشر شد، نشان داد که بعد از اجرایی شدن این مصوبه در ۱۷ آبان ماه حدود چهار میلیون تن کالا ترخیص شده که البته در این مدت میزان ورود شناورهای حاوی کالاهای اساسی به گمرک و بنادر نیز قابل توجه بوده است.

سرویس خبری: صنعت غذا

منبع: ایسنا

شناسایی باکتری هایی که شامل گروه کلیفرم هستند گاهی برای تعیین ماهیت آلودگی ضروری است. آزمایشهای افتراقی برای شناسایی باکتریهای فوق باید با این آگاهی انجام گیرد، که تمام سویه های طبقه بندی شده که به گروه کلیفرم نسبت داده شده ضرورتا نمی تواند با تعریف اعلام شده در این دستور کار کاملا مطابقت داشته باشد. زیرا برخی از باکتریها ممکن است لاکتوز را تخمیر نکنند و یا در صورت تخمیر گاز تولید نکنند. علاوه بر این باکتریهای گرم منفی دیگر بجز کلیفرم ها، لاکتوز را تخمیر کرده و روی محیط کشت تولید درخشش می کنند(نظیر گونه های آئروموناس). اما تمام سویه های یک گونه واکنش یکسانی در محیط کشت نخواهند داشت. ارگانیسم ها جهش یافته، صدمه دیده و تغییر پذیر ممکن است به آزمایش ها پاسخ متفاوتی بدهند. هر چند آزمایش های متداول IMViC (یعنی ایندول، متیل رد، وگس پرسکوئر و معرف سیترات) برای تشخیص افتراقی کلیفرم ها مفید است اما شناسایی کاملی را فراهم نکرده و برای دستیابی به نتایج دقیق به آزمایش های بیوشیمیایی بیشتری نیاز است.

۱-۳-خالص سازی کشت میکروبی

دست یابی به یک کشت خالص هنگامی حاصل می شود که از مرکز یک پرگنه(کلنی) کاملا ایزوله شده نمونه ای برداشته و سپس روی پلیت های تریپتون سوی آگار یا نوترینت آگار بصورت خطی کشت داده شود. اگر یک بخش از کلنی برداشته شده ابتدا در پپتون مایع(براث) یا آب مقطر امولسیونه(تلقیح) شده باشد و سپس کشت خطی داده شود توزیع بهتری از کلنی هادر پلیت های دوم حاصل می گردد. هنگامی که برداشت یک کلنی از کشت اولیه صورت می گیرد باید توجه داشت برخی از میکرو ارگانیسم هایی که کلنی مجزا ایجاد نکرده اند ممکن است سلول های کلنی مورد نظر را احاطه کرده باشند. در این مواقع کشت های ثانویه را در ۳۵ درجه سانتیگراد به مدت ۲۴ ساعت گرماگذاری کرده و برای اطمینان از وجود تنها باسیل های گرم منفی بدون اسپور، بر روی یک کلنی منفردی که به خوبی ایزوله شده باشد آزمایش رنگ آمیزی گرم انجام می گیرد. همچنین می توان اکسیداز منفی بودن کشت میکروبی را تعیین نمود. باسیل های بدون اسپور گرم منفی، اکسیداز مثبت باکتریهای کلیفرم نیستند اما ممکن است آئروموناس باشند که به عنوان شاخص آلودگی مدفوعی محسوب نمی شوند.

گاهی تنوع و تغییر در ارگانیسم های گروه کلیفرم مشاهده می گردد و واکنشهای مخلوط در محیط کشت افتراقی می تواند بیانگر این تغییرات در کشت خالص باشد. واکنشهای مثبت – منفی پایدار در محیط های کشت افتراقی یک کشت مخلوط را نشان می دهد که حاصل خالص سازی نامناسب است.

۲-۱-۳- روش آزمایش های تشخیص افتراقی(IMViC)

۱-۲-۱-۳- آزمایش ایندول

مقدمه: ایندول محصول متابولیسم تریپتوفان است. آنزیم تریپتوفاناز، تریپتوفان موجود در پپتون و سایر ترکیبات محیط کشت را به ایندول، اسکاتول و ایندول استیک اسیدتبدیل می کند.

مواد و وسایل موردنیاز:

۱-محیط های کشت INMیا تریپتیکاز پپتون براث(تریپتوفان براث)

۲-معرف کواکس(پارا دی متیل آمینو بنزآلدئید)که برای تهیه آن به روش زیر عمل می کنیم: ۵ گرم پارا دی متیل آمینو بنزآلدئید را در ۷۵ میلی لیتر الکل ایزو آمیل(یا نرمال آمیل) حل کرده و ۲۵ سی سی HCL غلیظ به آن اضافه می کنیم. معرف باید زردرنگ بوده و PH کمتر از ۶ باشد.

۳-لوله های آزمایش و جالوله ای و پلیت

۴-چراغ الکلی، آنس یا لوپ، پیپت و پوآر

روش انجام آزمایش:

۱-پس از برداشتن یک کلنی از محیط کشت EMB آن را در لوله های حاوی محیط کشت تریپتوفان براث وارد می کنیم.

۲-به مدت ۲۴ ساعت در انکوباتور ۳۵ درجه سانتیگراد قرار می دهیم.

۳-در پایان این مدت به هر لوله ۰٫۲ تا ۰٫۳ میلی لیتر محلول معرف (واکنش گر) اضافه نموده و تکان می دهیم، ۱۰ دقیقه صبر کرده و سپس نتایج را مشاهده می کنیم.

۴-تشکیل رنگ قرمز تیره در لایه سطحی آمیل الکل، نشاندهنده پاسخ مثبت به آزمایش ایندول است. در صورتی که رنگ اصلی محلول حفظ شده باشد نتیجه آزمایش ایندول منفی است. رنگ نارنجی احتمالا نشاندهنده حضور اسکاتول ناشی از تجزیه ایندول می باشد.

۲-۲-۱-۳-آزمایش متیل رد

تئوری آزمایش: این آزمایش PH نهایی را اندازه گیری می کند، یعنی به بررسی تولید اسید حاصل از تجزیه گلوکز به وسیله باکتریها می پردازد.واکنش های متابولیکی که به وسیله تولید گاز و آزمایش های متیل رد و وکس پرسکوئر مشخص می گردد، با یکدیگر بستگی داشته و در شناسایی افتراقی اعضای گروه کلیفرم مفیدند.

مواد و وسایل موردنیاز:

۱-محیط کشت MRVP

۲-معرف متیل رد(که به صورت آماده وجود دارد)

۳-لوله های آزمایش و جالوله ای و پلیت

۴-چراغ الکلی، آنس یا لوپ، پیپت و پوآر

روش انجام آزمایش:

۱- ابتدا محیط MRVP را طبق دستورالعمل کارخانه سازنده آماده و استریل می نمائیم.

۲-ابتدا یک آنس از باکتری را در لوله حاوی محیط کشت MRVP کشت داده و نمونه ها را در انکوباتور۳۵ درجه سانتیگراد قرار می دهیم.

۳-پس از ۳ تا ۵ روز گرماگذاری، به هر لوله ۵ قطره محلول شناساگر قرمز متیل اضافه می کنیم.

۴-مشاهده رنگ قرمز مشخص بیانگر پاسخ مثبت به آزمایش متیل رد و رنگ زرد واضح بیانگر پاسخ منفی برای آزمایش متیل رد است. سایه ی رنگی مبهم و نامشخص به عنوان نتیجه مشکوک و احتمالا عدم خالص سازی درست کشت میکروبی می باشد.

۵- با بررسی روزانه کشت های میکروبی (در روزهای۴،۳،۲ و یا ۵) گاه می توان موارد مثبت را زودتر از موعد مشاهده نمود.

۳-۲-۱-۳-آزمایش وگس پرسکوئر

تئوری آزمایش: این آزمایش برای تعیین استوئین که به صورت متابولیکی به وسیله برخی از باکتریهای کلیفرم در محیط پپتون-گلوکز تولید می شود، پیشنهاد شده است.

مواد و وسایل موردنیاز:

۱-محیط کشت MRVP

۲-پتاس ۴۰ درصد و آلفا نفتول

۳-لوله های آزمایش و جالوله ای و پلیت

۴-چراغ الکلی، آنس یا لوپ، پیپت و پوآر

روش انجام آزمایش:

۱-ابتدا محیط MRVP را طبق دستورالعمل کارخانه سازنده آماده و استریل می نمائیم.

۲-از کلنی های باکتری در محیط EMB یک آنس برداشته و در محیط MRVP کشت می دهیم.

۳-به مدت ۴۸ یاعت در دمای ۳۵ درجه سانتیگراد قرار داده در پایان مدت به یک میلی لیتر از محیط کشت میکروبی ۰٫۶ میلی لیتر محلول آلفا نفتول و ۰٫۲ میلی لیتر محلول پتاس ۴۰ در صد اضافه می کنیم.

۴- تشکیل رنگ صورتی تا قرمز لاکی ظرف ۵ دقیقه بیانگر پاسخ مثبت به آزمایش است.

۵-از خواندن رنگ بعد از مدت ۵ دقیقه اجتناب می کنیم. همچنین لوله هایی که در آنها رنگ مسی تشکیل شده را کنار می گذاریم.

۴-۲-۱-۳-آزمایش سیترات سدیم

تئوری آزمایش: این آزمایش توانایی باکتریها در مصرف سیترات به عنوان تنها منبع کربن را بررسی میکند.

مواد و وسایل موردنیاز:

۱-محیط کشت سیمون سیترات

۲-لوله های آزمایش، جالوله ای و پلیت

۳-چراغ الکلی، آنس یا لوپ، پیپت و پوآر

روش انجام آزمایش:

۱-ابتدا محیط سیمون سیترات آگار را طبق دستورالعمل کارخانه سازنده آماده و استریل می نمائیم.

۲-از کلنی های مشخص در محیط EMB توسط آنس سوزنی برداشته و در محیط کشت شیبدار سیمون سیترات به صورت عمقی و سطحی کشت داده و به مدت ۲۴ تا ۴۸ ساعت در انکوباتور در دمای ۳۵ درجه سانتیگراد قرار می دهیم.

۳-رشد روی محیط که معمولا به رنگ آبی است(یا کدر شدن محیط کشت) به عنوان پاسخ مثبت و عدم رشد را به عنوان پاسخ منفی در نظر میگیریم.

۵-۲-۱-۳-آزمایش حرکت:

تئوری آزمایش: بررسی حرکت باکتریها در محیط هایی مثل SIM یا موتیلیتی مدیوم انجام می گیرد. به علت اینکه این محیط دارای آگار حدود ۲٫۵ تا ۳٫۵ در هزار می باشد، باکتری هایی که دارای تاژک هستند قادر به نفوذ در بین مواد این محیط خواهند بود. بنابراین اگر با آنس سوزنی باکتری را بطور عمودی در این محیط ها فرو ببریم و کشت بدهیم، چون این دو محیط بصورت آگار تال تهیه می شوند، اگر باکتری تاژه داشته باشد در رد آنس چیزی مشاهده نمی گردد و تمامی محیط کدر می شود که این کدورت بستگی به نوع باکتری از نظر تعداد تاژه دارد.

مواد و وسایل موردنیاز:

۱-محیط های کشت SIM یا موتیلیتی مدیوم

۲-لوله های آزمایش، جالوله ای و پلیت

۳-چراغ الکلی، آنس ، پیپت و پوآر

روش انجام آزمایش:

۱-ابتدا محیط SIM را طبق دستورالعمل کارخانه سازنده آماده و استریل می نمائیم.

۲-یک آنس از محیط کشت باکتری در محیط EMB برداشته و در سطح بالایی محلول کشت تا عمق ۵ میلیمتر تلقیح را انجام می دهیم. سپس لوله ها را به مدت ۱ تا ۲ روز در ۳۵ درجه سانتیگراد گرماگذاری می نماییم، اگر پس از این مدت پاسخ منفی بود، ۵ روز دیگر در دمای ۲۲ تا ۲۵ درجه سانتیگراد گرماگذاری را ادامه میدهیم.

۳-مشاهده رشد انتشار یافته در محیط کشت از نقطه فرو بردن آنس سوزنی بیانگر پاسخ مثبت است.

۴-به جای این کار می توانیم محیط کشتی بدون آگار تهیه کرده و آزمایش را با کشت میکروبی تازه و جوان با استفاده از روش قطره معلق روی لام برای ارگانیزم های متحرک انجام دهیم (.(Hanging Drop Slide Technique

۲-۳- تست حضور و غیاب کلیفرم ها:

تئوری آزمایش:

جهت تست احتمالی می توان از یک تست دیگر استفاده نمود که در محیطی به نام present absent می باشد. این تست، تست حضور وغیاب ((P/A جهت تشخیص کلیفرم ها در آب نیز نامیده میشود. روش P/A روش ساده اصلاح شده تخمیر چند لوله ای استاین روش وجود یا عدم وجود کلیفرم ها در آب می باشد. از مزایای آن می توان به انجام آزمایش روی تعداد زیاد نمونه در واحد زمان و نیز سهولت انجام آزمایش اشاره کرد.

برای این منظور از محیط کشت P/A که به شرح زیر آماده می گردد استفاده میکنیم:

مواد مورد نیاز:

۱-لاکتوز براث(هیدراته): ۱۳ گرم

۲-لوریل تریپتوز براث(هیدراته): ۱۷٫۵ گرم

۳-بروموکروزول ارغوانی: ۰٫۰۰۸۵ گرم

۴-آب مقطر: ۱ لیتر

نکته: به علت اینکه مقدار نمونه مورد آزمایش، ۱۰۰ میلی لیتر می باشد ، همچنین مقدار محیط کشت ۵۰ میلی لیتر می باشد، در نتیجه غلظت محیط کشت باید سه برابر باشد پس اعداد فوق ضربدر سه خواهد شد.

روش آزمایش:

۱-در ابتدا لاکتوز براث و لوریل تریپتوز براث را بدون استفاده از گرما در آب حل مینماییم.

۲-برومو کروزول ارغوانی را در ۱۰ میلی لیتر سود ۰٫۱ نرمال حل کرده و به محلول آبگوشت اضافه می کنیم .

۳-میلی لیتر از محیط کشت آماده شده را در داخل بطری ۲۵۰ سی سی درب دار می ریزیم.

۴- بطری حاوی محیط کشت رابه مدت ۱۲ تا ۱۵ دقیقه در دمای ۱۲۱ درجه سانتیگراد در اتوکلاو استریل می کنیم.(PH=6.8)

۵-از نمونه مورد نظر پس از ۲۵ بار به هم زدن، ۱۰۰ میلی لیتر برداشته و داخل بطری حاوی محیط کشت می ریزیم،بطری را آنقدر تکان میدهیم تا در داخل آن نمونه و محیط کشت به طور یکنواخت مخلوط گردند.

۶-بطری حاوی نمونه و محیط کشت را در انکوباتور در دمای ۳۵ درجه سانتیگراد به مدت ۲۴ تا ۴۸ ساعت قرار می دهیم.

۷-تشکیل رنگ زرد در محیط نشان دهنده شرایط اسیدی در نتیجه تخمیر لاکتوز است.اگر گاز نیز تولید شود با تکان دادن بطری به آرامی و ایجاد کف در محیط می توان به وجود آن پی برد.

۸-برای تست تاییدی تمام محیط های کشتی که واکنش اسیدی (زردرنگ)یا گازی داده اند را به محیط BGB منتقل کرده و در دمای ۳۵ درجه سانتیگراد به مدت ۴۸ ساعت قرار می دهیم وجود گاز در محیط BGB نشاندهنده(+) بودن واکنش است